Lyofilisering, även känd som frystorkning, är en process som används för att bevara biologiskt material genom att ta bort vatten från provet, vilket involverar först frysning av provet och sedan torkning, under vakuum, vid mycket lågt temperaturer. Lyofiliserade prover kan lagras mycket längre än obehandlade prover.
Varför används frystorkning?
Lyofilisering, eller frystorkning av bakteriekulturerstabiliserar kulturerna för långvarig lagring samtidigt som man minimerar skadan som kan orsakas av strikt torkning av provet. Många mikroorganismer överlever väl när de lyofiliseras och kan lätt rehydratiseras och odlas i odlingsmedier efter långvarig lagringstid.
Lyofilisering används också i bioteknik och biomedicinska industrier för att bevara vacciner, blodprover, renade proteineroch annat biologiskt material.
Denna korta laboratorieförfarande kan användas med alla kommersiellt tillgängliga frysetorkar för att bevara din kultursamling.
Processen
Processen för frystorkning är faktiskt en tillämpning av ett fysiskt fenomen som kallas sublimering: övergången av ett ämne från fast till ett gasformigt tillstånd, utan att först passera genom vätskan fas. Under lyofilisering avlägsnas vattnet i det frysta provet som vattenånga utan att först tina provet.
Vanliga misstag
Ett av de vanligaste misstagen när det gäller lyofilisering är att inte känna till provets smältpunkt, vilket gör det svårt att välja rätt lyofilisator. Dina prover kan smälta under processen. Ett annat vanligt misstag är att tänka att kallare är bättre när frystorkning på en hylltyp frystork. Under primärtorkning bör du ställa in hylltemperaturen till precis under provets eutektiska temperatur. Det borde finnas tillräckligt med värme för att uppmuntra provets molekyler att röra sig - men förhindra smältning.
Ett tredje misstag är att använda fel utrustning för dina prover. Eftersom frystorkar används i en gruppinställning bör du veta följande innan du köper en:
- Hur mycket fukt som kommer att lyofiliseras
- Vad provet är (och den eutektiska temperaturen)
- Så här använder du frysetorkaren ordentligt
Om enheten inte används korrekt kan det förstöra alla prover. Som bringar oss till ytterligare ett vanligt misstag: Att inte underhålla vakuumpumpen. Pumpen måste vara i utmärkt fungerande skick för att lyofilisering ska fungera. Om pumpen körs med gasballasten öppen 30 minuter före och efter frystorkningsprocessen ökar pumpens livslängd. Genom att öppna gasballasten rensas föroreningar ur pumpen för att förhindra skador på inre komponenter. Du bör kontrollera pumpoljan ofta för missfärgning och partiklar och byta olja vid behov. Regelbundna oljebytningar håller pumpen i ett optimalt vakuum under frystorkningsprocessen.
Slutligen kan det vara ett stort misstag att ha fel tillbehör för frystorkning för din lyofiliseringsprocess. Behöver du ett proppprov under ditt vakuum? Sedan krävs en stoppkammare. Frysar du i kolvar? Se sedan till att ha en torkkammare med portar.
Genom att undvika ovanstående misstag kan du ge bättre vård av din frystork och pump och få bättre prover när din frystorkning är klar.
referenser
Labconco News. "Topp 5 misstag gjorda i lyofiliseringsprocessen."