För att olika arter ska avvika från vanliga förfäder och köra Evolution, reproduktiv isolering måste ske. Det finns flera typer av reproduktiv isolering som leder till speciation. En av de vanligaste metoderna är prezygotisk isolering som äger rum innan befruktning sker mellan gameter och förhindrar olika arter från sexuellt reproducerande. I grund och botten anses de vara annorlunda om individer inte kan reproducera sig arter och avviker på livets träd.
Det finns flera typer av prezygotisk isolering som sträcker sig från oförenlighet med gameter till beteenden som resulterar i oförenlighet och till och med en typ av isolering som fysiskt hämmar individer från föder upp.
Mekanisk isolering - könsorganens oförenlighet - är förmodligen det enklaste sättet att hindra individer från att reproducera sig med varandra. Oavsett om det är formen på reproduktionsorganen, platsen eller skillnaderna i storlek som förbjuda individer att koppla ihop, när könsorganen inte passar ihop, är det inte troligt att parning är att hända.
I växter fungerar mekanisk isolering lite annorlunda. Eftersom storlek och form är irrelevant för växtreproduktion, resulterar mekanisk isolering vanligtvis av användningen av en annan pollinerare för växterna. Till exempel en anläggning som är strukturerad för pollinering av bi kommer inte att vara kompatibla med blommor som är beroende av kolibrier att sprida sina pollen. Även om detta fortfarande är ett resultat av olika former, är det inte formen på de faktiska gameterna som betyder något, utan snarare kompatibiliteten mellan blommformen och pollinatorn.
Olika arter tenderar att ha olika avelsäsonger. Tidpunkten för kvinnliga fertilitetscykler kan resultera i temporär isolering. Liknande arter kan vara fysiskt kompatibla, men fortfarande kanske fortfarande inte reproduceras på grund av deras parningsperioder som inträffar vid olika tider på året. Om honorna av en art är bördiga under en given månad, men hanarna inte kan reproducera sig vid den tiden på året, kan det leda till reproduktiv isolering mellan de två arterna.
Ibland överlappar parningssäsonger av mycket liknande arter något. Detta gäller särskilt om arten lever i olika områden som inte lämnar chans för hybridisering. Det har emellertid visats att liknande arter som lever i samma område i allmänhet inte har faser av överlappande parning, även om de gör det i olika miljöer. Det är troligt att det är en anpassningskaraktär som syftar till att minska konkurrensen om resurser och kompisar.
En annan typ av prezygotisk isolering mellan arter har att göra med individernas beteenden, och i synnerhet beteendet runt parningstiden. Även om två populationer av olika arter är både mekaniskt och tillfälligt kompatibla, är deras faktiskt parningsritualbeteende kan vara tillräckligt för att hålla arten i reproduktiv isolering från en annan.
Parningsritualer, tillsammans med andra nödvändiga parningsbeteenden - som parningssamtal och dans - är mycket nödvändiga för män och kvinnor av samma art för att indikera att det är dags att reproducera. Om parningsritualen avvisas eller inte erkänns kommer inte parning att inträffa och arten isoleras reproduktivt från varandra.
Till exempel blåfotade booby fågeln har en mycket detaljerad parningsdans som hanarna måste utföra för att beva kvinnan. Hona antingen accepterar eller avvisar framstegen hos hanen, dock andra fågelarter som inte har samma sak parningsdansen ignoreras helt av kvinnan - vilket betyder att de inte har någon chans att reproducera sig med en kvinnlig blåfot drummel.
Även mycket nära besläktade arter har preferenser för var de bor och var de reproducerar. Ibland är dessa föredragna platser för reproduktionshändelser oförenliga med arter, vilket leder till vad som kallas livsmiljöisolering. Uppenbarligen, om individer av två olika arter bor ingenstans nära varandra, finns det ingen möjlighet att reproducera. Denna typ av reproduktiv isolering leder till ännu mer specifikation.
Men även olika arter som lever i samma landskap kanske inte är kompatibla på grund av deras föredragna plats för reproduktion. Det finns vissa fåglar som föredrar en viss typ av träd, eller till och med olika delar av samma träd, för att lägga sina ägg och göra sina bon. Om liknande fåglarter finns i området kommer de att välja olika platser och får inte avlas. Detta håller arten separat och oförmögen att reproducera med varandra.
Gametisk isolering säkerställer att endast spermier av samma art kan tränga igenom ägget hos den arten och inga andra. Under sexuell reproduktion smälts det kvinnliga ägget med den manliga spermierna och tillsammans skapar de en zygot. Om spermierna och ägget inte är förenliga kan befruktning inte ske. På grund av vissa kemiska signaler som frigörs av ett ägg kanske inte spermierna lockas till det. En annan faktor som förhindrar fusion är en spermier som inte kan tränga igenom ett ägg på grund av sin egen kemiska sammansättning. Endera av dessa skäl är tillräcklig för att frustrera fusionen och förhindra bildandet av en zygot.
Denna typ av reproduktionsisolering är särskilt viktigt för arter som reproduceras externt i vatten. Till exempel släpper kvinnorna i de flesta fiskarter helt enkelt sina ägg i vattnet i deras föredragna avelsland. Hanfisk av den arten kommer sedan med och släpper sina spermier över äggen för att befrukta dem. Men eftersom detta sker i en flytande miljö, sopas en del av spermierna bort av vattenmolekyler och sprids. Om det inte fanns några gametiska isoleringsmekanismer på plats, skulle några spermier kunna smälta samman med något ägg, vilket skulle resultera i hybrider av vilken art som helst som passade i vattnet där vid den tiden.